技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 溶解多肽的方法及多肽應(yīng)用的注意點
溶解多肽的方法及多肽應(yīng)用的注意點
更新時間:2012-01-05   點擊次數(shù):2256次

多肽的溶解度取決元計算的物理特性。氨基酸可分類為酸性,堿性,極性,非極性,疏水性。多肽有高含量的非極性疏水性氨基酸或極性不帶電荷的氨基酸。建議溶解在有機溶液中(例如:DMF,甲醇,丙醇,異丙醇,DMSO)。總之,酸性多肽一般溶解于堿性溶液中,而堿性多肽溶解在酸性溶液中。
氨基酸的屬性
堿性:Arg,His(H),Lys(K)
非極性疏水性:Ala(A),Ile(I),Len(L),Met(M),Phe(F),Pro(P),Trp(W),Val(V)
極性不帶電荷:Asn(N),Cys(C),Glg(G),Gln(Q),Ser(S),Thr(T),Tyr(Y)
酸性:Asp(D),Glu(E)
Bachem公司發(fā)布每批號的產(chǎn)品分析報告(ADS),提供在特殊溶液中的溶解度。客戶可以酌情按產(chǎn)品分析報告中溶液來溶解多肽。或者客戶可以按下列方法試驗小量樣品中多肽的溶解度。由于多肽的溶解特性取決于其氨基酸成分。在選擇適當?shù)娜軇┲拔覀兘ㄗh先查一下多肽的氨基酸序列,
1、 堿性多肽(堿性氨基酸數(shù)量>酸性氨基酸數(shù)量)應(yīng)該先用小量酸性氨基酸溶液(例如:醋酸或三氟醋酸)溶解,然后稀釋劑所需的濃度。制備高濃度的儲存液時,應(yīng)用80%醋酸溶解多肽。也可用20%醋酸溶解減少醋酸對于檢測系統(tǒng)的不良影響。
2、 酸性多肽(酸性氨基酸數(shù)量>堿性氨基酸數(shù)量)應(yīng)該先用小量堿性氨基酸溶液(例如0.1%氨水,NH4OH),然后用水稀釋到所需的濃度。應(yīng)該注意,對于含有半胱氨酸(Cysteine)的多肽要避免使用氨水,因為在PH堿性條件下會促使二硫鍵的形成。
3、 中性或者高度疏水性多肽,含有許多極性不帶電荷的氨基酸或非極性疏水性氨基酸,應(yīng)該用小量的有機溶劑(例如:DMF,甲醇,丙醇,異丙醇,DMSO)溶解,因為DMSO可形成氨基酸甲風(fēng)化。
4、 離液劑(例如尿素,鹽酸胍)有時用來溶解凝聚的多肽,但如有可能應(yīng)當盡量不用,因為離液劑會干擾多肽的生物學(xué)應(yīng)用。在個別情況下,多肽的溶解時間較長,甚至達幾個小時,在水浴中超聲波打幾分鐘可促使大顆粒多肽的溶解。但是不要加度加熱。含有Trp,Met,Cys的多肽要額外小心避免氧化,應(yīng)該用無氧的水或還原劑(例如DTT)來溶解。儲藏時,多肽溶液應(yīng)該分裝后置于-15℃,可以保持穩(wěn)定幾個月,含有Trp,Met,Cys的多肽半衰期較短,不宜長期保存。

多肽在溶解和儲存時,應(yīng)遵循下列要點:
1、 多肽的凈重
在準備多肽的溶液時,應(yīng)考慮到多肽的凈重問題。研究用多肽的HPLC純度一般達到95%以上,而多肽的固體含量在70-90%范圍內(nèi),這是因為多肽含有的其它離子(例如:醋酸/三氟 乙酸)和殘余的潮氣。每個批號的多肽含量都記錄在分析數(shù)據(jù)報告上
2、 多肽凍干粉的處置
*多肽長期保存應(yīng)放置在-15℃以下。
*多肽容易吸潮,應(yīng)先把裝有多肽的瓶放在玻璃器中,至于室溫下平衡溫度,然后才能打開瓶稱量多肽,多肽吸收水分后將影響穩(wěn)定性使多肽含量減少。
*從瓶中稱出所需量的多肽后,應(yīng)立刻將瓶蓋擰緊。
3、溶解于儲存
*多肽應(yīng)溶解在適當?shù)娜芤褐校核嵝远嚯膽?yīng)溶解在堿性溶液中,堿性多肽應(yīng)溶解在酸性溶液中。必要時可用超聲波幫助溶解。
*多肽含有Trp,Net,Cys應(yīng)該特別注意免氧化.應(yīng)該用無氧的水或還原劑.
*儲存時,多肽溶液應(yīng)該分裝后置于-15℃以下,多數(shù)含有Trp,Net,Cys的多肽半帥期教短,不應(yīng)長期保存。
 

 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
主站蜘蛛池模板: 色吊丝永久性观看网站| 西西人体www44rt大胆高清| 亚洲自拍欧美综合| 亚洲日韩精品A∨片无码| 久久亚洲精品无码aⅴ大香| sss欧美华人整片在线观看| 黄色三级理沦片| 第一次处破女18分钟高清| 村上里沙在线播放| 少妇无码av无码专区线| 国产精品久久久久久久久齐齐| 国产a免费观看| 亚洲欧洲自拍拍偷午夜色无码 | 美女的胸www又黄的网站| 波多野结衣xxxxx在线播放| 日本漫画全彩口工漫画绅士| 太大了轻点丝袜阿受不了| 国产嗯嗯叫视频| 亚洲校园春色小说| 一区二区三区久久精品| 香蕉网站在线观看| 欧美高清视频www夜色资源| 少妇人妻无码精品视频| 国产成人精品久久| 亚洲色国产欧美日韩| 久久久久久国产精品无码下载| 高清性色生活片a| 欧美激情一区二区三区中文字幕 | 手机看片国产免费永久| 最近免费中文字幕大全高清大全1| 性久久久久久久| 国产一区二区三区日韩精品 | 半甜欲水兄妹np| 久久精品人人爽人人爽快| 91精品久久久久久久99蜜桃 | 国产99热在线观看| 亚洲精品成人网站在线观看| 国产福利在线视频尤物tv| 全彩福利本子h全彩在线观看 | 91chinese在线| 精品国产不卡一区二区三区 |